国家海洋局《污水生物毒性监测技术规程发光细菌急性毒性测试-费歇尔弧菌法》提到,样品毒性水平的表征方法采用检测结果中的15min发光抑制率H进行评价。根据H大小将毒性等级分为3级,相应等级分别为低度毒性风险、中度毒性风险、高度毒性风险,分级方法如表1所示。中科院土壤研究所制订的水质毒性分级标准中,根据相对发光率的大小将毒性等级分为低毒、中毒、重毒、高毒、剧毒5个等级。
发光细菌检测水质生物毒性结果的评价标准:
目前,市面上应用最广泛的发光细菌有3种:明亮发光杆菌、费氏弧菌、青海弧菌,如图1所示。其中,明亮发光杆菌和费氏弧菌为海洋菌,青海弧菌为我国发现的淡水菌。ZnSO-4·7H2O对3种菌种的EC50(单一化学物质使抑光率达到50%时该物质的浓度)小的为费氏弧菌,费氏弧菌的灵敏度更高。
明亮发光杆菌(P.phosphoreum)以及费氏弧菌(Vibriofischeri)等所涉的国内外标准。ISO11348的3个标准,主要区别在于费氏弧菌的状态不同:第1标准采用的是新鲜制备的费氏弧菌;第2标准采用的是液体干细菌;第3标准采用是冻干粉细菌。其中,ISO11348-3-2017是应用最广泛的发光细菌生物毒性检测国际标准。涉及青海弧菌的暂时没有标准,仅在《水和废水监测分析方法》第四版书籍中提到。
发光细菌的区别:
ISO11348-3-2017与GB15441—1995相比,主要有以下两点区别:
1)利用的发光细菌不同,且保存菌种的温度不同,前者用的是费氏弧菌,保存温度为-20℃;后者为明亮发光细菌,保存温度为2~5℃;因此,对于需要长期保存的冻干粉而言,冷冻温度越低越好;
2)前者要求测定加入水样前发光细菌的原始荧光强度,并根据对照试样做出校正,避免了细菌样品不均匀带来的误差影响。
慕迪WTox-8000生物毒性在线分析仪采用ISO 11348 的方法,以发光细菌(费希尔弧菌)和样品反应时的发光强度变化来快速准确地测试出样品的毒性,毒谱范围含盖多于五千种潜在的毒性物质。广泛用于饮用水水源安全、应急评估及多种污染物毒性测定,毒性测试技术是一种基于生物传感技术的毒性检测系统,它提供一种有效应对供水污染(无论是故意破坏还是事故造成的)的检测手段。由于急性毒性测试可以在5~30分钟内完成,因而能保证对水质变化进行快速反应。
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